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细胞粘附分子CD44在肾病综合征、慢性肾小球肾炎患者外周血表达水

[摘 要] 目的:检测细胞粘附分子CD44在肾病综合征(Nephrotic syndrome,NS)、慢性肾小球肾炎(Chronic glomerulonephritis,CGN)患者外周血表达水平,探讨其临床意义。方法:选取我院2013年7月~2016年7月收治的57例NS患者、69例GGN患者及同期60名健康体检者,分别
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 [摘 要] 目的:检测细胞粘附分子CD44在肾病综合征(Nephrotic syndrome,NS)、慢性肾小球肾炎(Chronic glomerulonephritis,CGN)患者外周血表达水平,探讨其临床意义。方法:选取我院2013年7月~2016年7月收治的57例NS患者、69例GGN患者及同期60名健康体检者,分别纳入NS组、GGN组及对照组,采用流式细胞仪检测3组受试者外周血单个核细胞CD44表达水平,并分析CD44表达水平与NS患者、GGN患者血浆白蛋白(ALB)、胆固醇(CE)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的相关性。结果:CGN组患者外周血CD44表达水平高于NS组,NS组患者外周血CD44表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析示,外周血CD44表达水平与NS患者ALB呈负相关,与CE呈正相关,与CGN患者Cr、BUN呈正相关(P<0.05)。结论:NS、CGN患者外周血CD44表达水平超出正常范围,可能通过免疫机制参与NS、CGN的发生发展,同时,外周血CD44表达水平与患者肾功能存在一定相关性,对于辅助病情判断亦具有一定价值。
  [关键词] 细胞粘附分子;CD44;肾病综合征;慢性肾小球肾炎
  中图分类号:R692 文献标识码:A 文章编号:2095-5200(2016)06-094-03
  DOI:10.11876/mimt201606035
  肾病综合征(Nephrotic syndrome,NS)、慢性肾小球肾炎(Chronic glomerulonephritis,CGN)发病有多种因素参与,其中免疫损伤是二者发生过程中的共同环节 [1]。细胞免疫、体液免疫平衡失调是导致肾脏疾病发病并进展至终末期肾衰竭、影响患者生存质量的主要原因[2]。作为细胞粘附分子家族重要成员,CD44主要参与细胞与细胞、细胞与基质间特异性粘连过程,在肿瘤、器官移植排斥反应、自身免疫性疾病的发生发展中扮演着重要角色[3]。本研究就NS、CGN患者外周血CD44表达水平进行了检测与分析,探讨CD44在肾小球病变中作用机制。
  1 资料与方法
  1.1 一般资料
  选取我院2013年7月—2016年7月收治的57例NS患者、69例GGN患者及同期60名健康体检者,分别纳入NS组、GGN组及对照组。NS患者、GGN患者均经病史、体格检查、实验室检查或肾脏病理组织学检查,并参照改善全球肾脏病预后组织(KDIGO)慢性肾脏疾病诊疗指南(2012年版)确诊[4],且入组前未接受相关治疗,排除合并感染、肝功能异常、其他免疫性疾病者,健康体检者血压、蛋白尿均处于正常范围内,既往无肾病史、严重感染史及免疫性疾病。各组受试者年龄、体质量指数(BMI)、性别等一般临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经我院医学伦理委员会批准,受试者均知情同意并签署书面协议。
  1.2 研究方法
  1.2.1 外周血CD44表达水平检测 于入组次日清晨抽取受试者空腹肘静脉抗凝血2 mL,使用淋巴分离液分离,以1×106/mL提取单个核细胞悬液,取细胞悬液100 μL,依次加入20 μL CD44-FITC(法国Immunotech公司)及阴性对照羊抗鼠IgG1-FITC(法国Immunotech公司),避光处理30 min后,使用Epics Altra 型流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司)上机检测[5]。CD44表达水平计算方法[6]:CD44阳性细胞百分比=(待测标本内标记阳性细胞数/受检细胞总数)×100%-非特异结合细胞百分比。比较各组受试者外周血CD44表达水平的差异。
  1.2.2 肾功能相关指标检测及相关性分析 于入组次日清晨抽取NS组、CGN组患者空腹肘静脉抗凝血2 mL,使用AU5800全自动生化分析仪(美国Beckman Coulter公司)对其血浆白蛋白(ALB)、胆固醇(CE)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)进行检测,运用Pearson法计算CD44表达水平与ALB、CE、Cr、BUN的相关性。
  1.3 统计学分析
  数据采用SPSS19.0进行分析,性别以(n/%)表示,并采用χ2检验,年龄、BMI、CD44表达水平等计量资料以(x±s)表示,相关性分析采用Pearson法,以P<0.05为差异有统计学意义。
  2 结果
  2.1 外周血CD44表达水平
  CGN组患者外周血CD44表达水平高于NS组,NS组患者外周血CD44表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
  2.2 外周血CD44表达水平与肾功能相关指标相关性
  Pearson相关分析显示,外周血CD44表达水平与NS患者ALB呈负相关,与CE呈正相关,与CGN患者Cr、BUN呈正相关(P<0.05)。见表2。
  3 讨论
  细胞粘附分子是一类来自不同基因的配体/受体分子,具有介导细胞信号转导、调节细胞增殖分化等作用,在近年来肾脏疾病的机制研究中得到了广泛关注[7-8]。
  研究发现,CD44在人类和大鼠正常肾脏组织中几乎无表达,肾小囊上皮细胞、亨氏拌升支粗段小管上皮细胞以及远端小管上皮细胞可见少量表达,但在肾脏疾病中,CD44蛋白表达往往处于异常增高状态[9]。Fogo等[10]
  发现,系膜增生性肾炎患者外周血CD44表达水平明显升高,且与系膜细胞活化增殖、肾小球内炎症细胞浸润具有密切关联;邹丽萍等[11]指出,CD44可促进机体炎症因子分泌,参与炎症反应。本研究就CD44在NS、CGN患者外周血内表达水平进行了检测,结果表明,NS、CGN患者外周血CD44表达水平均处于异常升高状态,考虑与CD44诱导淋巴细胞在肾组织内广泛浸润、活化炎症和产生炎性因子等作用有关[12],说明CD44在NS、CGN发生发展过程中扮演了重要角色。 本研究相关性分析结果可见,CD44表达水平与NS患者ALB呈负相关,与CE呈正相关,其机制可能为:CD44具有调节细胞游走功能作用,可通过促进淋巴细胞在肾间质内广泛浸润,造成外周血淋巴细胞数量或功能异常、淋巴细胞亚群间比例失衡,而T淋巴细胞功能失调被认为是NS发病的重要机理之一[13-14],而NS患者以高脂血症、低白蛋白血症为主要表现[15],故随着NS患者外周血CD44表达水平的升高,其CE逐渐升高,ALB逐渐下降。
  通过对CD44与CGN患者肾功能相关指标的分析,可以发现,CD44表达水平与患者Cr、BUN呈正相关,与ALB、CE无明显相关性,与CGN患者肾脏病理生理改变具有一致性:CGN患者肾小球滤过率的下降可导致肌酐清除率降低,继而导致体内Cr、BUN水平大幅上升,且其上升程度与患者病情具有密切关联[16],而CD44可与透明质酸配体结合,上调细胞活素类物质、化学活素类物质表达,参与CGN细胞免疫病理过程,促进巨噬细胞向肾小球、肾小管间质浸润,导致病情进展[17]。此外,Maruyama等[18]发现,肾脏疾病患者尿液内CD44细胞密度亦呈现明显增高状态,说明CD44对系膜细胞及系膜基质的影响在NS、CGN发生发展过程中可能发挥了一定作用。
  因此,可以认为,细胞粘附分子CD44在NS、CGN患者外周血表达水平均呈现异常增高状态,说明CD44在NS、CGN发病过程中扮演了重要角色,与此同时,CD44与患者肾功能相关指标具有显著相关性,亦可为患者病情判断提供一定参考。本研究为NS、CGN发病机制的深入了解及临床防治策略的制定提供了思路,但需要注意的是,由于目前临床对于肾脏疾病的确切发病机制尚无明确阐释,关于CD44对NS、CGN发生发展的具体机理仍有待更深层次的研究加以了解。
  参 考 文 献
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