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多指标联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床应用

【摘要】目的探討血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、2微球蛋白(2MG)及尿微量白蛋白(mAlb)联合检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的临床应用价值。 方法选取264例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,分为两个观察组,即132例糖尿病肾病患者为DN组,132例单
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  【摘要】目的探討血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、β2微球蛋白(β2MG)及尿微量白蛋白(mAlb)联合检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的临床应用价值。
  方法选取264例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,分为两个观察组,即132例糖尿病肾病患者为DN组,132例单纯糖尿病患者为T2DM组;另选取132例同期健康体检者为对照组。在贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪上采用乳胶增强免疫散射比浊法测定血清中的Cys C、β2MG及尿液mAlb水平;罗氏Cobas E411型全自动电化学发光免疫分析仪上采用酶动力学法测定血清Hcy水平。对比分析各组指标的检测结果。
  结果与对照组比较,DN组和T2DM组的Cys C、Hcy、β2MG、mAlb四项观察指标的检测结果均明显增高(P<0.01),且DN组的四项指标检测结果增高更明显 (P<0.01);相关性分析结果显示,Cys C与Hcy呈正相关(r=0.663, P<0.05),Cys C、Hcy与 mAlb均呈负相关(r=-0.712、-0.632, P均<0.05),而Cys C、Hcy、mAlb均与β2MG相关不显著;ROC曲线分析结果也显示,Cys C、Hcy、β2MG及mAlb的ROC曲线下面积分别为0.815、0.916、0.807和0.783,标准误(s〖AKx-D〗)分别为0.050、0.023、0.045和0.018,95%置信区间分别为0.736~0.893、0.875~0.965、0.733~0.885和0.712~0.865;四项指标(Cys C+Hcy+β2MG+mAlb)联合检测的阳性率为96.21%(127/132),三项指标(Cys C+Hcy+β2MG)联合检测的阳性率为90.15%(119/132),两项指标(Cys C+Hcy)联合检测的阳性率为84.10%(119/132),均明显高于单项指标(Cys C)检测的阳性率71.96%(95/132)。
  结论定期监测血清Cys C、Hcy、β2MG及尿液mAlb等多项指标变化,有助于了解糖尿病肾病患者的病情发展,其临床应用价值优于单项观察指标,值得推广应用。
  【关键词】血清胱抑素C;同型半胱氨酸;β2微球蛋白;尿微量白蛋白;糖尿病肾病
  中图分类号:R446.1文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.10031383.2017.02.003
  【Abstract】Objective To investigate the clinical value of combined detection of serum cystatin C(Cys C),homocysteine(Hcy),β2microglobulin (β2MG) and microalbuminuria(mAlb) in early diagnosis of diabetic nephropathy(DN).
  Methods 264 cases of type 2 diabetes mellitus(T2DM) patients were selected as research objects and divided into two observation groups,that was,132 DN patients were selected as DN group,and 132 patients with simple diabetes mellitus as T2DM group.And another 132 healthy subjects were selected as control group.And then,serum levels of Cys C,β2MG and mAlb were determined by latex enhanced immune scattering turbidimetry on Beckman Kurt AU680 automatic biochemical analyzer.Serum level of Hcy was measured by enzyme kinetic method on Roche Cobas E411 automatic electrochemiluminescence immunoassay analyzer.Test results of each index were compared and analyzed among all groups.
  ResultsCompared with the control group,detection results of Cys C,Hcy,β2MG,mAlb of the DN group and T2DM group all significantly increased(P<0.01),and the detection results of the four indexes of the DN group increased more significantly(P<0.01).Correlation analysis showed that the Cys C was positively correlated with Hcy(r=0.663,P<0.05),Cys C,Hcy and mAlb were negatively correlated(r=-0.712,-0.632,all P<0.05),while Cys C,Hcy,mAlb were all not significantly correlated with β2MG.ROC curve analysis results also showed that area under the ROC curve of Cys C,Hcy,β2MG and mAlb were 0.815,0.916,0.807 and 0.783,respectively,standard errors(s〖AKx-D〗) was 0.050,0.023,0.045 and 0.018,respectively,95% confidence intervals was 0.736~0.893,0.875~0.965,0.733~0.885 and 0.712~0.865,respectively.The positive rate of combined detection of the four indicators (Cys C+Hcy+β2MG+mAlb) was 96.21%(127/132),that of combined detection of the three indicators (Cys C+Hcy+β2MG) was 90.15%(119/132),and that of combined detection of the two indicators (Cys C+Hcy) was 84.10%(119/132),all significantly higher than that 71.96%(95/132) of single index (Cys C). 根据国际糖尿病联盟(IDF)的最新统计数据显示,我国糖尿病患者已高达1.14亿,居世界首位。糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病发展过程中导致的终末期病变,是2型糖尿病(T2DM)最常见的严重并发症,其对人体健康的危害程度居慢性非传染性疾病的第三位[1]。DN隐蔽性强,当患者出现典型临床症状时,通常为时已晚,即使通过治疗也难以达到理想效果[2~3]。因此,寻找糖尿病肾病早期诊断指标对早期预防肾功能衰竭具有重要的意义。本文探讨血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、β2微球蛋白(β2MG)、尿微量白蛋白(mAlb)等多指标联合检测在DN早期诊断中的应用价值,以期为DN早期诊断与治疗提供理论和实验依据。
  1资料与方法
  1.1一般资料
  选取2014年2月~2016年9月我院内分泌科收治的2型糖尿病患者264例为研究对象,其中糖尿病肾病患者132例(DN组),男84例,女48例,平均年龄(53.5±8.3)岁,平均病程(6.5±3.3)年;单纯糖尿病患者132例(T2DM组),男76例,女56例,平均年龄(52.5±8.6)岁,平均病程(5.1±3.5)年。选取同期健康体检者132例为对照组,男70例,女62例,平均年龄(55.8±8.9)岁,经糖耐量试验排除糖尿病,血压、血脂均正常,无糖尿病及高血压家族史。三组对象一般资料比較差异无统计学意义(P>0.05)。
  1.2仪器与试剂
  Cys C和β2MG检测试剂盒购自上海执诚生物科技有限公司;Hcy检测试剂盒购自上海罗氏诊断产品有限公司;mAlb试剂盒购自宁波美康生物科技有限公司;贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪购自美国贝克曼库尔特有限公司;罗氏Cobas E411型全自动电化学发光免疫分析仪购自德国ROCHE有限公司。
  1.3入组标准
  (1)2型糖尿病的诊断标准符合1999年世界卫生组织(WHO)规定的诊断与分型标准;(2)近期无经常熬夜、吸烟、饮酒、饮咖啡等不良影响因素;(3)排除患有严重心、肝、肺、肾、脑等脏器功能不全患者;(4)排除血液系统疾病及急性感染性疾病患者。
  1.4方法
  所有观察对象均空腹状态下采集静脉血5 ml,留取中段尿2 ml。血液标本2000 r/min离心10 min,取血清检测;尿液标本2000 r/min离心5 min,取上清液检测。其中Cys C、β2MG、mAlb采用乳胶增强免疫散射比浊法测定,在贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪上样检测;Hcy采用酶动力学法测定,在罗氏Cobas E411型全自动电化学发光免疫分析仪上样检测。所有检测项目在实验前均进行室内质控分析,高、中、低值质控均在控。结果判断采用试剂盒说明书中的参考范围:Cys C为0~1.25 mg/L;Hcy为0~15.0 μmol/L;β2MG为0~2.8 mg/L;mAlb为0~30 mg/L。
  1.5统计学方法
  应用SPSS 19.0统计学软件进行分析处理。计量资料以均数±标准差(〖AKx-D〗±s)表示,多个样本均数比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用q检验(NewmanKeuls法),计数资料以百分率表示,组间比较采用χ2检验,相关性分析采用Pearson检验;诊断效能评价采用ROC曲线,检验水准:α=0.05,双侧检验。
  2结果
  2.1各组观察指标检测结果的比较
  与对照组比较,DN组和T2DM组的Cys C、Hcy、β2MG、mAlb四项观察指标的检测结果均明显增高(P<0.01),且DN组增高更明显 (P<0.01)。见表1。
  2.2DN组中各观察指标间的相关性分析
  DN组中Cys C与Hcy呈正相关(r=0.663, P<0.05);Cys C、Hcy与 mAlb均呈负相关(r=-0.712、-0.632,P均<0.05);Cys C、Hcy、mAlb均与β2MG相关不显著。
  2.3DN组中各观察指标对DN的诊断效能
  根据DN组和对照组的各指标检测结果绘制出ROC曲线图,并计算曲线下面积、标准误和置信区间。结果显示,Cys C、Hcy、β2MG及mAlb的ROC曲线下面积分别为0.815、0.916、0.807和0.783,标准误(s)分别为0.050、0.023、0.045和0.018,95%置信区间分别为0.736~0.893、0.875~0.965、0.733~0.885和0.712~0.865,均具有较高的诊断效能。见图1。
  2.4DN组中多项指标联合检测与单项指标的阳性率比较
  四项指标(Cys C+Hcy+β2MG+mAlb)联合检测的阳性率为96.21%,三项指标(Cys C+Hcy+β2MG)联合检测的阳性率为90.15%,两项指标(Cys C+Hcy)联合检测的阳性率为84.10%,单项指标(Cys C)检测的阳性率71.96%,四组诊断阳性率比较差异有统计学意义(P<0.001),单项指标诊断阳性率低于联合检测,并且诊断阳性率随着联合指标数量增多而有递增趋势。见表2。
  3討论
  Cys C是一种低分子量碱性糖化蛋白质,在所有有核细胞中恒定持续表达,生成速度和循环水平较为恒定,不受肌肉、感染、蛋白排泄率的影响,且与年龄、性别、肿瘤、免疫性和内分泌疾病无关,是肾功能早期损伤较好的内源性标志物[4~5]。Hcy是一种与血管损伤密切相关的氨基酸,DN早期往往会发生血管内皮细胞的损伤,从而导致Hcy增高,是肾功能早期损伤的另一内源性标志物[6]。β2MG是一种小分子量蛋白质,生成量恒定,不与血浆蛋白结合,可自由通过肾小球,几乎全被近曲肾小管完全吸收,继而在肾脏进行分解代谢,能较早反映肾小球滤过功能的损伤情况,也作为早期肾功能损伤的敏感指标物[7]。正常情况下,肾小球滤过膜上的负电荷屏障会阻止mAlb通过,尿液中几乎检测不到mAlb的存在,但肾损伤早期主要破坏肾小球滤过膜的负电荷屏障,致使尿液中出现大量的mAlb,因此,检测尿液中的mAlb含量变化也可反映肾功能的早期损伤情况[8]。尽管这些观察指标都能从不同角度反映肾功能早期变化情况,但单一指标的诊断效能比较低,因此推测,多指标联合检测有可能会提高其临床诊断效能。
  本研究结果显示,与对照组比较,DN组和T2DM组的Cys C、Hcy、β2MG、mAlb四项观察指标的检测结果均明显增高,且DN组的增高更明显;相关性分析结果显示,Cys C与Hcy呈正相关,Cys C、Hcy与 mAlb均呈负相关,而Cys C、Hcy、mAlb均与β2MG相关无显著性。说明当肾小球功能出现轻微损伤时,血浆Cys C、Hcy、β2MG及尿mAlb浓度均可出现异常变化,且会随着病情加剧不断加重。ROC曲线分析结果也显示,Cys C、Hcy、β2MG及mAlb的ROC曲线下面积分别为0.815、0.916、0.807和0.783,标准误(s〖AKx-D〗)分别为0.050、0.023、0.045和0.018,95%置信区间分别为0.736~0.893、0.875~0.965、0.733~0.885和0.712~0.865,说明这四项观察指标均具有较高的诊断效能,都可以用于DN的早期诊断,而且四项指标联合检测的阳性率(96.21%)明显高于单项指标检测的阳性率(71.96%)。
  综上所述,定期监测Cys C、Hcy、β2MG、mAlb等多项指标变化,有助于了解DN患者的病情发展,其临床应用价值优于单项观察指标,值得推广应用。
  参考文献
  [1]Pasala SK,Rao AA,Sridhar GR,et al.Built environment and diabetes[J].Int J Diabetes Dev Ctries,2010,30(2):6368.
  [2]李自顺,黄共产.多项指标联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床应用[J].中国现代药物应用,2016,10(4):1920.
  [3]郑利平.血清游离脂肪酸、胱抑素C与2型糖尿病肾病关系研究[J].现代预防医学,2014,41(1):128129,133.
  [4]Inker LA,Okparavero A,et al.Cystatin C as a marker of glomerular filtration rate:prospects and limitations[J].Curr Opin Nephrol Hypertens,2011,20(6):631639.
  [5]Hojs R,Bevc S,Ekart R,et al.Serum cystatin Cbased equation compared to serum creatininebased equations for estimation of glomerular filtration rate in patients withchronic kidney disease[J].Clin Nephrol,2008,70(1):1017.
  [6]刘成功.胱抑素C、同型半胱氨酸与早期糖尿病肾病的关系[J].中国现代药物应用,2016,10(4):1819.
  [7]张鹏飞.尿胱抑素C在诊断老年2型糖尿病肾小管早期损伤中的临床意义[J].中国老年学杂志,2013,33(6):14041405.
  [8]陈翠兰,张兴坤,车树强,等.糖肾康胶囊对糖尿病肾病Ⅲ期尿微量白蛋白的影响[J].天津中医药,2014,31(10):596598.
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